Blasticidina S Clorhidrato BioChemica

Comments

La blasticidina S pertenece a los antibióticos nucleósidos y fue aislada de Streptomyces griseochromogenes. Inhibe la síntesis de proteínas en procariotas y eucariotas al impedir la formación del enlace peptídico. Mientras tanto, se han aislado varios genes de resistencia a la blasticidina (una acetiltransferasa [bls] y dos deaminasas [bsr y BSD]). Los genes que codifican las deaminasas se utilizan como marcadores de selección. El clorhidrato de blasticidina S es soluble en agua o tampones (por ejemplo, HEPES). La concentración de trabajo depende del organismo seleccionado. Para E. coli se aplica una concentración de 50 - 100 μg/ml de blasticidina S, para las células de mamíferos de 3 a 10 μg/ml, en algunos casos hasta 30 μg/ml. Dado que las informaciones varían, se recomienda determinar la concentración correcta para cada línea celular u organismo. Cabe mencionar que las altas concentraciones de sal inactivarán la blasticidina S. Por lo tanto, para la selección de E. coli resistente a la blasticidina S, la concentración de cloruro de sodio debe reducirse de 10 a 5 g/L en el caldo LB / agar LB (10 g de triptona, 5 g de extracto de levadura, 5 g de NaCl por litro de medio; adicionalmente 15 g/L de agar para las placas). Como alternativa, se puede aumentar la concentración de blasticidina. Estabilidad: El clorhidrato de blasticidina S se envía a temperatura ambiente y debe almacenarse refrigerado a su llegada. La sustancia seca es estable durante al menos 2 años. Se recomienda filtrar-esterilizar las soluciones. Se prepara una solución madre a una concentración de 50 mg/ml. El pH de la solución no debe superar el pH 7, debido a la inactivación de la blasticidina S. Las soluciones son estables durante aproximadamente 2 semanas a +4°C y congeladas (-20°C) durante aproximadamente 2 meses. No congelar/descongelar repetidamente las soluciones.