Albúminas (BSA) Fracción V (pH 7,0)

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La albúmina de suero bovino (BSA) se añade como componente estabilizador de proteínas/enzimas a varios tampones de reacción y almacenamiento de enzimas. La concentración suele oscilar entre el 0,01% (0,1 mg/ml; p. ej. ref. 2) y el 3% (30 mg/ml; p. ej. ref. 1, 2). La BSA se añade a los tampones concentrados 10X de las enzimas modificadoras del ADN o de las enzimas de restricción en una concentración de 0,5 mg/ml (véase, por ejemplo, ref. 6, 8). Alternativamente, la BSA puede ser sustituida por gelatina para tales fines en la misma concentración. Además, la albúmina se aplica como agente de bloqueo para bloquear las superficies no unidas de las membranas de blotting en los immunoblots (3%; ref. 1, 2, 7) o ELISAs (3% en PBS, ref. 2) o para la dilución de antisueros y soluciones de stock de anticuerpos, respectivamente. En los ELISA, la BSA se sustituye frecuentemente por leche en polvo sin grasa (A0830). Como estándar para las determinaciones de proteínas, véase la ref. 9.Esta fracción de albúmina ha sido fabricada por una combinación del método de choque térmico y precipitación con alcohol. La albúmina es estable en polvo (3 años) o en solución (tampones biológicos como PBS; un año a +4°C a -20°C). Las soluciones madre se preparan en concentraciones de hasta el 20%. Si se forman cristales durante el almacenamiento de las soluciones, pueden volver a disolverse calentando a 37°C y mezclando. Normalmente, se añade azida sódica a una concentración final de 2 mM (o 0,02 - 0,2%) para evitar contaminaciones microbianas.

Literature

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