Aprotinina BioChemica

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La aprotinina fue descrita de forma independiente por dos grupos de trabajo diferentes. Por ello, originalmente se le dieron dos nombres: Inhibidor de la tripsina pancreática bovina (BPTI) e inhibidor de la tripsina-calicreína (TKI). Es una proteína muy básica compuesta por 58 aminoácidos (1, 2). La aprotinina inhibe la tripsina, varias quimotripsinas, la calicreína de diversos orígenes y la plasmina. Como inhibidor de la proteasa, se suele utilizar una concentración de 2 a 10 μg/ml (aproximadamente 1 μM). La concentración de trabajo de 500 KIU/ml (aprox. 10 μM) dada en la ref. 3 se estima muy alta. Estabilidad: La aprotinina puede almacenarse en forma liofilizada a +4°C durante un período indefinido. En soluciones salinas o tampón a pH 5 - 8, la aprotinina es estable durante al menos un mes a +4°C o varios años a -20°C. Las soluciones madre (por ejemplo, 10 mg/ml) deben congelarse en pequeñas alícuotas y utilizarse de una sola vez, ya que la descongelación repetida provocaría la agregación del polipéptido aprotinina. Las soluciones con un valor de pH inferior a 4 y superior a 9 deben utilizarse inmediatamente. Debe evitarse el contacto directo con la luz solar, los rayos UV y los agentes reductores. La aprotinina también es estable en agua, metanol al 70 %, etanol al 70 % o acetona al 50 % (2, 3). Definición de unidad: una unidad inhibidora de tripsina (TIU) inhibe la actividad de 2 unidades de tripsina en un 50 %, donde una unidad de tripsina hidroliza 1 μmol de Nα-benzoil-DL-arginina-p-nitroanilida (BAPNA) por minuto a pH 7,8 y 25°C. 1 TIU (unidad inhibidora de tripsina) corresponde a aproximadamente 1300 KIU (unidades inhibidoras de calicreína) y 1 TIU corresponde a una unidad de Ph. Eur.

Literature

(1) Kassell, B. & Laskowski, Sr., M. (1965) Biochem. Biophys. Res. Com. 20, 463-468. El inhibidor básico de la tripsina del páncreas bovino: V. Los enlaces disulfuro. (2) Kassell, B. (1970) Methods Enzymol. 19, 844-852. Inhibidor de la tripsina-calicreína bovina (inhibidor de Kunitz, inhibidor básico de la tripsina pancreática, inhibidor polivalente de órganos bovinos). (3) Fritz, H. & Wunderer, G. (1983) Drug Res. 33, 479-494. Bioquímica y aplicación de la aprotinina, el inhibidor de la calicreína procedente de órganos bovinos.