Histología

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Histología

La histología es el área de la biología que estudia la composición, estructura y características de los tejidos orgánicos de los seres vivos. La histología está estrechamente relacionada con la anatomía microscópica, ya que su estudio no se detiene en los tejidos, sino que va más allá, observando también las células internamente y otros corpúsculos, y está relacionada con la bioquímica, la citología y la medicina.

La histología ha adquirido una gran importancia en la medicina y la biología, ya que es crucial para estas disciplinas porque se encuentra entre las intersecciones de la bioquímica, la biología molecular y la fisiología, por un lado, y los procesos patológicos y sus consecuencias, por otro.

Las técnicas histológicas clásicas se aplican en los laboratorios médicos para el diagnóstico de una gran variedad de enfermedades. Estas técnicas son adecuadas en la mayoría de los casos de diagnóstico. Sin embargo, cuando el diagnóstico con estas técnicas clásicas no puede considerarse fiable, deben utilizarse métodos adicionales. Estas técnicas incluyen la tinción histoquímica, los métodos inmunohistoquímicos, la hibridación del ADN, la hibridación fluorescente in situ (FISH), la PCR y la citometría de flujo, entre otros.

Los laboratorios médicos antes mencionados se centran esencialmente en la ciencia aplicada principalmente basada en la producción (número de pruebas diagnósticas), a diferencia de los laboratorios de investigación que se centran en la ciencia básica sobre una base académica.

Un laboratorio médico o laboratorio clínico es el lugar en el que se suelen realizar pruebas en muestras clínicas con el fin de obtener información sobre la salud de un paciente en lo que respecta al diagnóstico, el tratamiento y la prevención de enfermedades.

Los laboratorios de investigación utilizan técnicas convencionales para los procedimientos de Genómica, Proteómica y Cultivo Celular.

Productos PanReac AppliChem para los laboratorios de los hospitales:

  • Laboratorios médicos: Productos para Microscopía.
  • Laboratorios de investigación: Productos para Genómica, Proteómica y Cultivo Celular.


Laboratorios médicos
En muchos países hay principalmente dos tipos de laboratorios médicos según el tipo de investigación realizada.

  • Laboratorios de hospital: laboratorio adjunto a un hospital para realizar pruebas a los pacientes. Podemos encontrar 4 tipos diferentes:
  • Patología clínica: hematología, histopatología, citología, patología de rutina
  • Microbiología clínica: bacteriología, micobacteriología, virología, micología, parasitología, inmunología, serología.
  • Bioquímica clínica: análisis bioquímicos, ensayos hormonales, etc.
  • Laboratorio de diagnóstico molecular o citogenética y laboratorio de biología molecular.
  • Laboratorios clínicos externos: para pruebas extremadamente especializadas, la muestra puede ir a un laboratorio de investigación externo.

ITW Reagents ofrece una gama completa de productos para histología, hematología y microbiología bajo la marca PanReac AppliChem, que incluye los reactivos más utilizados en el proceso de preparación de muestras para su examen en el microscopio. Con esta gama se cubren todas las etapas de fijación, aclarado, inclusión de parafina, tinción y montaje. También disponemos de una amplia gama de productos para la investigación en diferentes campos de Life Sciences para ensayos que se desarrollarán en los laboratorios de los hospitales: genómica, proteómica y cultivos celulares.

Muchos de los productos de la marca PanReac AppliChem utilizados en microscopía llevan el marcado CE IVD en cumplimiento del nuevo Reglamento Europeo (UE) 2017/746 sobre productos de diagnóstico in vitro (IVDR).

Técnicas y etapas del procesamiento histológico
Aunque la mayoría de las etapas del procesamiento histológico son comunes, algunas de ellas son exclusivas de un solo tipo de procesamiento de muestras. Por ejemplo, la inclusión se hace solo en tejidos y la fijación por calor solo en muestras de sangre.

Las etapas más comunes y los productos utilizados en ellas son los siguientes:

  • Fijación: La fijación interrumpe procesos de degradación que aparecen tras la muerte celular, tratando de conservar la arquitectura y composición tisular/celular lo más próxima posible a como se encontraba en el organismo vivo. El tipo más habitual es la fijación química con Formaldehído 3,7-4,0% p/v tamponado a pH=7 y estabilizado con metanol y, para una seguridad aumentada, el formol monodosis Histofix® Conservante listo para su uso.
  • Deshidratación y aclarado: La deshidratación es la eliminación completa del agua del espécimen o muestra de tejido para que se pueda incrustar adecuadamente en los medios de inclusión no hidrosolubles posteriores. Las piezas fijadas y lavadas se pasan por alcohol del 96% y luego por alcohol absoluto durante un tiempo variable, normalmente una hora y media en cada baño. El aclarado es la sustitución del agente deshidratante por una sustancia miscible con el medio de inclusión que vaya a utilizarse. Los productos más habituales en esta etapa son los alcoholes como el Etanol absoluto, Etanol 96%, Etanol 70% que pueden estar desnaturalizados o no además del Xileno.
  • Inclusión: La inclusión consiste en sustituir el agua del tejido por un medio líquido capaz de solidificarse en condiciones de temperatura adecuadas. Para ello se utiliza la Parafina P.F. 55-58°C plastificada + DMSO en lentejas o simplemente la Parafina P.F. 56-58°C en lentejas.
  • Corte: Los tejidos incluidos en la parafina se reducen a cortes lo suficientemente finos (4-6 micras) para permitir el paso de la luz para examinarla bajo un microscopio. Esto se hace con un microtomo: un instrumento mecánico que se utiliza para hacer secciones micrométricas de tejido. Recomendamos nuestro limpiador de parafina para mantener el micrótomo limpio.
  • Desparafinación-Hidratación: La desparafinación-hidratación es el proceso de eliminar el medio de inclusión de las secciones de tejido embebidas en parafina y rehidratarlas para una penetración adecuada de los colorantes. Los reactivos más habituales en esta etapa son los alcoholes como el Etanol absoluto, Etanol 96%, Etanol 70% que pueden estar desnaturalizados o no además del Xileno.
  • Tinción: La mayoría de los tejidos, sobre todo los de origen animal, son incoloros a menos que contengan algún tipo de pigmento. Por lo tanto, es necesario teñirlos para su observación con el microscopio. Esto se consigue con el uso de los colorantes, sustancias que, en contacto con un soporte adecuado, se unen a él de forma duradera transmitiéndole su color. Los colorantes más comúnmente utilizados son las Hematoxilina y la eosina, pero existe una gran variedad de tinciones dependiendo del tejido que se ha de colorear.
  • Montaje e inmersión: Una vez que las preparaciones hayan sido aclaradas, deben ser montadas definitivamente. Los agentes de montaje pueden ser acuosos y no acuosos; el tipo utilizado depende del protocolo correspondiente. Ejemplos de medios de montaje son el DPX, Bálsamo de Canadá y Eukitt®. Los medios de inmersión son líquidos, frecuentemente aceites naturales, que tienen un índice de refracción definido. Es importante que el índice de refracción sea de aproximadamente 1,5 (mismo índice que el vidrio). Esto permite una inmersión en aceite homogénea. Para ello se utiliza el Aceite de Inmersión o el Aceite de Cedro.
  • Análisis microscópico: Es la fase de observación al microscopio. No se necesitan reactivos adicionales.


Más arriba encontrará nuestra oferta de productos para histología de la marca PanReac AppliChem. Puede adquirir estos productos a través de nuestra red mundial de distribuidores.